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摘要：目的：探讨重组结核杆菌融合蛋白（EC）对结核分枝杆菌潜伏感染的筛查效果。 方法：选取2023年1-12月中国疾病预防控制信息系统如皋市登记的肺结核患者的家庭密切接触者513人、学校疫情的密切接触者787人。采用随机分组法将其分为对照组、观察组。对观察组进行重组结核杆菌融合蛋白（EC）检测，对照组患者进行卡介苗纯化蛋白衍生物（BCG-PPD）检测。将两组检测结果进行对比分析。 结果：PPD检测的诊断符合率比EC检测的诊断符合率低（p＜0.05）； EC潜伏感染筛查发现率5.80%较 PPD潜伏感染筛查发现率1.74%高（p＜0.05）。结论：重组结核杆菌融合蛋白（EC）检测对结核分枝杆菌潜伏感染的筛查具有较高的价值，值得在临床推广使用。

关键词：重组结核杆菌融合蛋白；密切接触者；结核分枝杆菌潜伏感染；筛查；敏感度

前言：结核病是一种慢性传染病，致病菌为结核分枝杆菌，其传播途径主要是呼吸系统传播[1]。《2023年全球结核病报告》显示，2022年全球约有超过130万人因结核病相关的疾病而死亡，其中我国占10%左右约13万，患结核病数在世界高居前三[2]。近年来，在COVID-19疫情、耐药性结核分枝杆菌的扩散以及人类免疫缺陷病毒感染等因素的共同作用下，结核分枝杆菌对人类的健康威胁呈现出了明显的加重趋势[3]。据世界卫生组织（WHO）调查显示，全球感染结核分枝杆菌的人口已高达25%左右，其中绝大多数为结核潜伏感染者[4]。目前，结核病已成为一项全球医学界共同关心的议题[5]。重视结核病的早期诊断，是提高结核病生存率的有效方式[6]。EC检测与PPD检测都是结核感染免疫学检测方法。本实验选取了2023年1月至12月中国疾病预防控制信息系统如皋市登记的肺结核患者的家庭密切接触者、学校疫情的密切接触者为研究对象，以探讨分析EC检测与PPD检测潜伏期对结核分枝杆菌潜伏感染的筛查效果。

1 资料及方法

1.1资料

选取2023年1月至12月中国疾病预防控制信息系统如皋市登记的肺结核患者的家庭密切接触者513例、学校疫情的密切接触者787人为研究对象，发现肺结核患者的家庭密切接触者45例、学校疫情的密切接触者14例经实验室检测及随访确诊为结核分枝杆菌潜伏感染者，对潜伏感染者予以预防性治疗，降低结核病发病风险。采用随机分组法将其分为对照组403例使用PPD检测筛查结核分枝杆菌潜伏感染，观察组897例使用EC检测结核分枝杆菌潜伏感染。纳入标准：非活动性肺结核及肺外结核者。排除标准：依从性差、严重不配合或有精神病史者。

对照组：家庭密接132人，男性与女性的比例为41：91；年龄为6月至92岁之间。学校疫情的密切接触者271人，男性与女性的比例为152：119，年龄在4-60岁之间。密切接触者共403人，男性与女性的比例为193：210，年龄在4-60岁之间。

观察组：家庭密接381人，男性与女性的比例为155：226；年龄为6月至65岁之间。学校疫情的密切接触者516人，男性与女性的比例为307：209，年龄在4-60岁之间。密切接触者共897人，男性与女性的比例为462：435，年龄在4-60岁之间。

对比两组的基本资料，组间差异小，在统计学上无意义（p＞0.05），具有比较价值。

1.2相关定义

结核分枝杆菌潜伏感染（LTBI）指的是机体虽然遭受了结核分枝杆菌（MTB）的感染，但是并未出现临床结核病症状及体征，在临床细菌学以及影像学方面也无法找到活动性结核病的证据[7]。

1.3方法

对照组患者进行PPD检测：使用1ml一次性注射器抽取0.1ml（5IU）的卡介苗纯化蛋白衍生物（BCG-PPD），用孟都氏法于前臂掌侧皮内注射。观察组进行EC检测：使用1ml一次性注射器抽取0.1ml（5U）的重组结核杆菌融合蛋白（EC），用孟都氏法于前臂掌侧皮内注射。

1.4观察指标

EC皮肤试验：48-72小时后，红晕或硬结的横径及纵径的平均直径≥5mm为阳性反应，凡有水泡、坏死、淋巴管炎者均属强阳性反应，无红晕、硬结或红晕硬结平均直径<5mm为阴性 [8]；PPD皮肤试验：48-72小时后，红晕或硬结的横径及纵径的平均直径5mm-9mm为一般阳性，10mm-14mm为中度阳性，≥15mm强阳性，凡有水泡、坏死、淋巴管炎者均属强阳性反应，阴性：无红晕、硬结或红晕硬结的横径及纵径的平均直径<5mm为阴性[9]。EC阳性、PPD强阳性判定为体内有结核分枝杆菌感染。

1.5资料分析方法

采用Excel2019和spss25.0进行数据整理、汇总及统计学分析。描述性分析肺结核密切接触者潜伏感染筛查情况等基本资料；计数资料之间的比较采用 χ２ 检验，若差异存在统计学意义，则使用Ｐ＜0.05表述。

2结果

2.1检测结果对比

家庭密接的密切接触者EC检测381人，PPD检测132人。

PPD强阳性6人，PPD强阳性率4.54%，PPD强阳性6人予γ干扰素试验检测均阳性，中度阳性1人，中度阳性率0.76%，中度阳性1人予γ干扰素试验阴性，一般阳性2人，一般阳性率1.52%，PPD阴性123人，PPD阴性率93.18%，PPD强阳性中确诊结核病例1例，PPD确诊率0.76%，PPD强阳性中既往结核病人1人，PPD既往结核率0.76%，PPD潜伏感染4人。PPD潜伏感染率3.03%。

EC阳性56人，EC阳性率14.69%，EC阳性56人予γ干扰素试验检测均阳性，EC阴性325人，EC阴性率85.30%，EC阳性中确诊结核病例7人，EC确诊率1.83%， EC阳性中既往结核病人8人，EC既往结核率6.06%， EC潜伏感染41人，EC潜伏感染率10.76%。

学校疫情的密切接触者EC检测516人，PPD检测271人。

PPD强阳性3人，PPD强阳性率1.10%， PPD强阳性3人予γ干扰素试验检测，其中1人阴性，中度阳性17人，中度阳性率6.27%，中度阳性17人予γ干扰素试验检测，其中1人阳性，一般阳性27人，一般阳性率9.96%，PPD阴性224人，PPD阴性率82.66%，PPD强阳性中确诊结核病例0例，既往结核病人0人， PPD潜伏感染3人，PPD潜伏感染率1.10%。

EC阳性 15人，EC阳性率2.90%，EC阳性15人予γ干扰素试验检测均阳性，EC阴性 501人，EC阴性率97.09%，EC检测阳性中确诊结核病例4人， EC确诊率0.78%，EC阳性中既往结核0人， EC潜伏感染11人，EC潜伏感染率2.13%。

家庭和学校疫情密切接触者共1300人，接受PPD检测403人，发现PPD强阳性9人，PPD强阳性率2.23%，PPD强阳性中1例γ干扰素试验检测阴性；中度阳性18人，中度阳性率4.47%，中度阳性中1例γ干扰素试验检测阳性；一般阳性29人，一般阳性率7.20%；PPD确诊结核病例1人，PPD确诊率0.25%；接受EC检测897人，EC阳性71人，予γ干扰素试验检测均阳性；EC阳性率7.47%，EC确诊结核病例11人，EC确诊率1.23%，PPD潜伏感染7人，PPD潜伏感染1.74%，EC潜伏感染52人，EC潜伏感染5.80%，EC、PPD总潜伏感染59人，总潜伏感染率4.54%。

PPD检测的诊断符合率为95.04%，EC检测的诊断符合率为100.00%。差异在统计学上有意义（p＜0.05）。如下表4：

3 讨论

结核病迄今为止依然是严重损害人类健康的主要传染性疾病，是世界关注的公共卫生问题，也是共同关注的社会问题，更是我国疾控中心重点关注的疾病之一[10]。从二十世纪八十年代至今，无论是结核病发病率极低的发达国家还是结核病发病率较高的发展中国家，结核病均出现了显著的上升趋势[11]。WHO早已宣布，结核病已然进入“全球紧急状态”，全球各国及各地区政府都应该加大结核病的控制力度，同时还应积极推进全程督导短程化学治疗策略（DOTS），并将该策略作为结核病治疗的核心内容[12]。从1995年至2010年十五年间，全球已有5500万结核病患者接受了DOTS治疗，其中有4400万经治疗后痊愈，有超过700万经治疗免于死亡[13]。经过多年努力，结核病呈现出了轻微的下降趋势，但在流民和移动人口中，结核病的控制依旧是不可忽视的问题[14]。

WHO数据显示，每年有超过300万的结核患者未被检测出，不仅导致结核感染患者不能及时诊治，还加大了家庭和社会群体之间的传播风险[15]。不利因素提醒我们在结核病控制中早期筛查尤为重要[16]。

PPD检测是目前常用的结核感染免疫学检测方法，但它需要考虑影像学、细菌学、临床表现、分子生物技术等许多方面，且该方法敏感性低，特异性差，不能鉴别卡介苗接种者，假阳性的结果影响结核病筛查[17]。因此，临床急需一种价格合适，应用简便，无需特殊仪器，适合基层医疗单位的皮肤诊断试剂[18]。EC是结核分枝杆菌的迟发性超敏反应皮肤试验抗原，一种新型皮试试剂，适应症为结核病筛查、结核杆菌感染诊断，可用于辅助结核病的临床诊断。“EC”为重组结核杆菌融合蛋白 “早期分泌性抗原靶6（ESAT-6）和培养滤液蛋白10（CFP-10）” 是通过基因工程方法表达MTB特异的ESAT-6和 CFP-10两种蛋白的融合蛋白，含适宜稳定剂，不含抗生素。这两种蛋白在卡介苗菌株中缺失，具有良好的免疫活性，刺激T细胞增殖，诱导T细胞释放INF-γ，可诱导特异的迟发型变态反应（DTH），以鉴别MTB感染状态，有望成为新一代诊断试剂的核心抗原，它克服了卡介苗假阳性的问题，特异性高，同时价格合理，可替代PPD+γ-干扰素成为广泛应用的高特异性结核感染诊断试剂盒。

本研究选取了2023年1-12月如皋市登记的肺结核患者的家庭密切接触者、学校疫情的密切接触者为研究对象，以探讨分析重组结核杆菌融合蛋白（EC）在结核分枝杆菌潜伏感染筛查中的重要意义，结果显示，PPD检测的诊断符合率较EC检测的诊断符合率低，差异有统计学意义（p＜0.05）；PPD潜伏感染筛查发现率1.74%，EC潜伏感染筛查发现率5.80%，差异有统计学意义（p＜0.05）。

综上所述，新型结核菌素试验EC检测对结核分枝杆菌潜伏感染筛查及辅助诊断结核病具有重大价值，值得在临床上推广使用。

参考文献：

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