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对比分析不同免疫检验方法检测乙肝病毒感染血清标志物的效果

高宏梅
  
大通媒体号
2023年18期
嵩明县中医医院检验科 云南昆明 651700

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【摘要】目的:分析不同免疫检验方法检测乙肝病毒感染血清标志物的效果。方法:将2022年全年范围内收治的乙型病毒性肝炎患者纳为受试对象(n=90),患者依次经酶标仪检测与胶体金法进行血清标注物的阳性筛查,评价两种检测方法的阳性检出情况。结果:酶标仪检测结果显示87名患者为乙型病毒性肝炎确诊(96.67%),3例为非感染(3.33%),准确率为96.67%,胶体金法检测结果显示71名患者为乙型病毒性肝炎确诊(78.89%),19名患者为非感染(21.11%),准确率为78.89%,两种方法的诊断准确率存在统计学意义(X2值=13.256,P值<0.001);酶标仪检测中HBsAg的阳性检出率最高,为70.00%(n=63),胶体金法检测中HBcAb的阳性检出率最高,为62.22%(n=56),同时与胶体金检测检测法相较,酶标仪检测法在血清标志物的中阳性检出中HBsAg、HBeAb、HBeAg的检出率更高,且组间存在统计学意义(P<0.05)。结论:酶标仪检测在乙型病毒性肝炎病毒血清标注物的阳性筛查中具有准确率更高的优势,因此可为患者治疗方案的制定与优化提供了有利条件。

【关键词】免疫检验方法;乙肝病毒;血清标志物检测

乙肝病毒(HBV)是一种嗜肝DNA病毒科中的正嗜肝DNA病毒属,是引起乙型肝炎(简称乙肝)的病原体。HBV感染是全球性的公共卫生问题,随着基因工程疫苗的生产和投入,乙肝疫苗的普及率逐年上升,感染率呈下降趋势。HBV主要通过血液传播,感染者的血液、精液和阴道分泌物中都含有HBV。乙肝的传播途径还包括母婴传播、性传播、血液传播等[1]。乙肝的症状包括食欲减退、恶心、疲乏、肝脏肿大及肝功能异常等。部分病例可转为慢性,少数可进一步发展为肝硬化、肝癌。我国属于HBV感染高流行区,一般人群HBsAg阳性率为9.09%。乙肝不仅严重影响人体健康,而且给家庭、社会造成沉重的经济负担,成为贫困地区因病致贫的一个重要因素。乙肝病毒感染在全球范围内普遍存在,据统计,全球约有2.4亿人患有乙肝[2]。乙肝病毒主要通过血液传播,如输血、注射、性接触等[3]。此外,乙肝病毒也可通过密切接触感染者的体液或血液而传播。乙肝病毒感染后,部分人可能转为慢性感染者。这些患者需要接受长期的抗病毒治疗,以避免病情恶化,甚至发展为肝硬化或肝癌。因此,慢性乙肝的及早筛查与治疗管理对于控制病情具有重要意义。乙肝病毒血清标志物检测是确定乙肝病毒感染状态的重要手段。通过检测血清中的乙肝病毒抗原、抗体等标志物,可以判断患者是否感染了乙肝病毒,以及感染的具体类型和阶段,这对于早期发现乙肝病毒感染、制定相应的治疗和管理方案具有重要意义。同时乙肝病毒血清标志物检测可以评估疾病的发展阶段和病情严重程度。例如,通过检测乙肝病毒DNA的载量,可以了解病毒复制的活跃程度,从而判断病情的进展情况。此外,通过检测肝功能指标,如谷丙转氨酶、谷草转氨酶等,可以评估肝脏损伤的程度,为制定治疗方案提供依据与指导。现本文对不同免疫检验方法检测乙肝病毒感染血清标志物的效果进行了比对分析,以了解各种方法的优缺点,从而根据具体情况选择最合适的检测方法,提高诊断效率,同时推动了医学研究的发展,为未来研发更先进、更有效的检测方法提供参考。

1资料与方法

1.1基础资料

将2022年全年范围内收治的乙型病毒性肝炎患者纳为受试对象(n=90)。90名患者中男47例,女43例,年龄为44-57岁,平均秩次为(50.59±5.19)岁。

纳入标准:①患者符合乙肝的诊断标准,包括HBsAg阳性、HBeAg阳性或HBeAb阳性等;②患者肝功能指标AST和ALT需在正常范围内,即不存在肝功能障碍的患者;③患者需自愿参加临床对比试验且资源签署知情同意书。

排除标准:①患者伴有其他严重肝病或乙肝并发症;②孕妇或哺乳期妇女;③同期参与其他药物试验的患者。

1.2方法

胶体金法:采集受检者的静脉血液,分离出血清样本,将血清样本滴加到试剂卡的加样处。等待一定时间,让血清样本与试剂卡上的胶体金颗粒标记的抗体结合。在试剂卡的测试区(T)观察是否出现一条紫红色带。如果出现紫红色带,说明样本中含有乙肝病毒相关标志物,否则说明样本中没有乙肝病毒相关标志物。在试剂卡的质控区(C)观察是否出现一条紫红色带。如果质控区出现紫红色带,说明试剂卡有效,否则说明试剂卡可能失效。

酶标仪检测:采集受检者的静脉血液,分离出血清样本,用于后续检测。将酶标板按顺序摆放,并对其进行编号,以便后续的实验操作和结果读取。将处理好的血清样本加入酶标板中,然后进行孵育,使抗原抗体反应充分进行。孵育后,将酶标板进行清洗,去除未结合的物质,然后进行干燥,将清洗干燥后的酶标板放入酶标仪中进行检测,记录各孔的光密度值。酶标仪会根据各孔的光密度值计算出相应的浓度或OD值,根据标准曲线得到定量结果。对检测结果进行分析,结合受检者的临床资料及其他相关检查结果,对其乙肝病毒感染状况、病情发展及治疗效果进行评估。同时中枢实验室的质控措施、操作人员的技能和经验等,严格遵守操作规程,确保实验条件的稳定和准确,以提高检测结果的可靠性。

.3判定指标

评价两种检测方法的阳性检出情况。

1.4统计学分析

试验各指标均通过统计学软件SPSS25.0检验,卡方比对计数资料(%)率;t值比对计量资料(均数±标准差);如组间数据有差异(p<0.05)。

2结果

2.1两种检测方法的准确率比较。

酶标仪检测结果显示87名患者为乙型病毒性肝炎确诊(96.67%),3例为非感染(3.33%),准确率为96.67%,胶体金法检测结果显示71名患者为乙型病毒性肝炎确诊(78.89%),19名患者为非感染(21.11%),准确率为78.89%,两种方法的诊断准确率存在统计学意义(X2值=13.256,P值<0.001)。

2.2两种检测方法的血清标志物检出率比较

酶标仪检测中HBsAg的阳性检出率最高,为70.00%(n=63),胶体金法检测中HBcAb的阳性检出率最高,为62.22%(n=56),同时与胶体金检测检测法相较,酶标仪检测法在血清标志物的中阳性检出中HBsAg、HBeAb、HBeAg的检出率更高,且组间存在统计学意义(P<0.05)。

3讨论

乙型病毒性肝炎是一种由乙型肝炎病毒感染引起且具备一定传染能力的肝炎,其传播途径主要包括血液传播、性接触、母婴垂直传播等[4]。该病毒攻击肝脏细胞,导致一系列的病理生理变化,临床表现主要为肝功能异常、肝细胞炎症、坏死等,乙肝在全球范围内都有较高的发病率,对患者的健康和生活质量与社会功能造成一定威胁与影响。乙型肝炎病毒会损害肝脏的功能,导致肝功能异常,如转氨酶升高、胆红素升高等。长期受病毒侵害,可能导致肝硬化、肝癌等严重后果。乙型肝炎病毒感染者可能出现全身症状,如乏力、食欲不振、恶心、呕吐等。这些症状会影响患者的日常生活和工作。乙型肝炎病毒感染者可能并发其他疾病,如肝性脑病、肝肾综合征等,严重威胁患者的生命安全。乙型病毒性肝炎的机制主要是由于乙型肝炎病毒对肝脏细胞的侵害,导致肝脏细胞功能障碍和坏死。乙型肝炎病毒进入肝脏细胞后,在细胞内复制和繁殖,释放病毒颗粒,进一步感染其他肝脏细胞。乙型肝炎病毒产生的代谢产物和免疫应答反应会对肝脏细胞造成损害,导致细胞功能障碍和坏死。长期受乙型肝炎病毒感染,肝脏细胞会发生免疫应答反应,导致肝纤维化和肝硬化。乙肝在全球范围内均有流行,特别是在亚洲和非洲地区发病率较高。在我国,乙肝表面抗原(HBsAg)阳性率高达10%~20%,即每100人中就有10~20人携带乙肝病毒。

乙型病毒性肝炎的诊断是确定患者是否感染乙型肝炎病毒的关键步骤。通过诊断,可以明确患者是否处于感染状态,以及感染的严重程度,这对于后续的治疗和管理具有重要的指导价值。乙肝病毒感染血清标志物检测是诊断乙肝的重要手段。通过检测血清中的乙型肝炎病毒抗原、抗体等标志物,可以明确患者是否感染了乙型肝炎病毒。这对于确定治疗方案、评估治疗效果以及预防传播具有重要意义。乙肝病毒感染血清标志物检测可以反映乙型肝炎病毒的复制活跃度。例如,HBV DNA水平越高,表示病毒复制越活跃,病情可能较重。此外乙肝病毒感染血清标志物检测还可以反映病情的进展情况。例如,随着病情的发展,HBeAg可能逐渐消失,而HBeAb出现。这些标志物的变化可以提示病情的发展方向,帮助医生及时调整治疗方案,控制病情发展。

酶标检测也称为酶免疫分析或酶联免疫分析,是一种广泛用于生物医学检测的重要技术。它基于酶的催化作用,通过特定的反应过程实现对目标物质的定量或定性检测。酶标检测的核心是酶促反应,即酶作为催化剂,加速化学反应的进行。在酶标检测中,酶促反应通常包括底物转化和产物生成两个阶段。酶促反应的速率和产物量与目标物质浓度呈正相关,从而实现定量检测。酶标检测通过信号放大技术,将微量的酶促反应产物放大,提高检测的灵敏度和准确性。常见的信号放大技术包括链式反应、信号放大偶联等。这些技术利用酶促反应的级联效应,将信号进行逐级放大,使得低浓度目标物质得以准确检测。在酶标检测中,特异性识别是指利用针对目标物质的特异性抗体或抗原,实现对目标物质的捕获和识别。这些特异性抗体或抗原与目标物质具有高度亲和力和特异性,能够准确、快速地捕获目标物质。特异性识别是酶标检测准确性的关键。同时酶促反应通常会伴随颜色变化。通过观察颜色变化,可以判断酶促反应是否发生以及产物的量。常见的颜色变化包括颜色深浅和显色反应等。这些颜色变化可以通过肉眼观察、分光光度计等方法进行定量测定。

胶体金法是一种常用的免疫分析方法,因其灵敏度高、稳定性好、操作简便等特点而被广泛应用于临床诊断、生物医药等领域。胶体金是指氯金酸在还原剂作用下形成的金颗粒悬液,呈红色或粉红色。这些金颗粒具有静电作用,可以与蛋白质等生物大分子结合形成胶体金复合物,从而用于免疫分析。

胶体金法的免疫反应是其核心部分。通过抗原抗体反应,将待测的抗原或抗体与胶体金标记的抗体或抗原结合,形成免疫复合物。这种免疫复合物可以通过肉眼观察或仪器检测进行定量或定性分析。胶体金的红色或粉红色是其独特的信号显示方式。当胶体金与抗原或抗体结合后,形成免疫复合物,这种复合物可以通过颜色变化进行观察。通过与标准品对比,可以确定待测物的浓度或是否含有特定抗原或抗体。

在乙肝病毒血清标志物的检测中,酶标检测法可以检测出较低浓度的抗原或抗体,因此对于一些早期感染、轻度感染或低浓度的病例,酶标检测法的准确性更高。酶标检测法可以检测多种标志物,如HBsAg、HBsAb、HBeAg等,适用于多种不同的应用场景。与胶体金法相比,酶标检测法的操作步骤较为简单,容易掌握,也适合在基层医疗机构推广使用。此外,酶标检测法可以与自动化仪器配合使用,实现快速、大量的样本检测,提高检测效率。

综上所述,在乙肝病毒血清标志物的检测中,与胶体金法检测相比,酶标检测法在血清标志物检测中具有更高的阳性检出率,这主要是由于其更高的灵敏度和特异性以及更简便的操作流程。

参考文献

[1] 宁云云. 对比分析不同免疫检验方法检测乙肝病毒感染血清标志物的效果[J]. 当代医药论丛,2023,21(14):134-137.

[2] 连惠强. 两种不同免疫检验方法对乙肝病毒感染血清标志物的效果比较[J]. 基层医学论坛,2020,24(10):1428-1429.

[3] 田仁凤. 用不同的免疫检验方法检测乙肝病毒感染血清标志物的效果分析[J]. 当代医药论丛,2022,20(5):151-153.

[4] 刘彬. 分析两种不同免疫检验方法对乙肝病毒感染血清标志物的效果[J]. 系统医学,2021,6(11):11-14.

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