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摘要：目的：利用病原学检测技术对一起食物中毒情况进行分析，了解导致此次食物中毒的病原菌。方法：通过标本采集，按照食品卫生微生物学检验以及变形杆菌食物中毒诊断要求对样本进行处理，并完成实验室检测。研究中采集的样品包含剩余米饭、呕吐物、腹泻物。结果：在采集的样品中均检出1型蜡样芽孢杆菌，检出的菌种生物学性状和血清型保持一致。剩余米饭中的蜡样芽孢杆菌菌落数为2.3×107个/g。结论：根据蜡样芽孢杆菌食物中毒的相关诊断标准可以对此次食物中毒的病原菌进行确定：该起食物中毒事件由蜡样芽孢杆菌引发。

关键词：蜡样芽孢杆菌；食物中毒；病原学检测

【中图分类号】 R155.3+2 【文献标识码】 A

前言

在2022年9月，跟高中发生了一起，午餐食物中毒情况，经过流行学调查和病原学检测工作确定了此次食物中毒，为蜡样芽孢杆菌引发的具体研究报告如下1研究资料与研究方法

1.1研究资料

在研究过程中需要准备灭菌生理盐水、甘露醇、卵黄多菌素、琼脂平板、血平板、营养琼脂平板、微量生化管以及细菌比浊板，采集的具体样本包含患者的呕吐物5份、腹泻物3份、剩余食物米饭2份、剩菜2份，同时对学校食堂工作人员的手表面、物体表面进行采集，分别为4份、9份。中毒患者在初期以及恢复期都需要进行血检查。

在对细菌进行分离和鉴定过程中，需要严格按照我国食品卫生检验方法中关于微生物学的相关标准进行操作。要根据卫生防疫细菌检测确定具体的操作方法。

1.2研究方法

1.2.1完成样品采集。从本次研究过程中的样品中选择8份样品包含剩余米饭1份、呕吐物4份、腹泻物1份、工作人员手拭子2份。

1.2.2材料制备。在操作过程中使用的试剂如下：0.85%的生理盐水、营养琼脂、三糖铁琼脂、Baird-parker平板、MYP、生化鉴定试剂盒、SS平板。

1.2.3确定检验项目。在本次食物中毒事件分析过程中，需要开展流行病学调查，完成蜡样芽孢杆菌、变形杆菌以及金黄色葡萄球菌培养鉴定。

1.2.4鉴定方法。根据我国食品卫生微生物学的相关检验标准开展检验工作。检验操作需要在安全柜内完成。

1.2.5具体的检验步骤：（1）涂片染色镜检。将获取的8份样品涂片后，经过革兰氏染色镜检进行分析。患者的呕吐物、腹泻物、剩余米饭中都包含大量革兰氏菌阳性芽孢杆菌。芽孢的具体形态为卵圆形，在菌体的中央分布。（2）样品稀释和分离。获取的呕吐物和腹泻物需要分段划线接种在Baird-parker平板、MYP、SS平板以及普通的营养琼脂平板中。剩余米饭需要利用生理盐水进行稀释，每一个稀释度都按照0.3mL、0.3mL、0.4mL的接种量分别加到3块Baird-parker平板、普通营养琼脂平板和MYP平板中。利用无菌L型棒将吸收后获取的样品溶液涂抹在整个平板上，静置10分钟后放置在36℃的环境下，培养24小时。（3）培养结果。Baird-parker平板上并未显示金黄色葡萄球菌、变形杆菌等菌落；普通营养琼脂板上有表面比较粗糙，为毛玻璃状、边缘不齐整不透明的菌落生长；MYP平板上有微粉红色菌落生长，这说明不发酵甘露醇，而菌落周围存在白色粉红色晕圈，这代表产生了卵磷脂酶。（4）纯培养。从每一个平板中需要挑出5个典型菌落划线接种在营养琼脂平板进行纯培养。放置在30℃的环境下培养24小时进行验证分析。

2研究结果

验证过程中需要挑选可疑菌落完成革兰氏染色镜检工作。挑选的可疑菌落为卵圆形，分布在菌体的中间。菌体两端比较平整，为长链状的形式排列。这说明存在革兰阳性芽孢大肠杆菌。

经过检验，生化结果见表1。

对挑选的5个可疑菌落进行验证后，确定均为蜡样芽孢杆菌，对其进行计算，剩余米饭中的蜡样芽孢杆菌菌落数达到2.3×107个/克。说明此次引发食物中毒的主要病原菌为1型蜡样芽孢杆菌。

3讨论

在样品检测过程中检测到蜡油芽孢杆菌菌落测量超过105cfu/g，可以认定此次食物中毒主要是由蜡样芽孢杆菌引发的。在本起食物中毒事件调查过程中，根据患者的临床症状、发病时间和生化检定结果可以确定为1型蜡样芽孢杆菌引发的呕吐型食物中毒。患者呕吐物、腹泻物和剩余米饭中的菌株生物性状以及血清型都保持一致。因为蜡样芽孢杆菌在自然界中广泛存在，达到一定数量时会引发食物中毒。在常规检测过程中，需要将食品标本中检出105cfu/g及以上可以作为诊断的主要依据[3]。

在本次调查中发现学校的食堂卫生设施存在问题，从业人员卫生意识比较淡薄。在食品加工和保存过程中没有严格按照相关规定进行操作，将头天中午剩米饭在外界环境中直接存放。因为环境温度相对较高，导致细菌生长繁殖，在放置一段时间后，细菌大量繁殖。再次加工时加热不彻底，导致此次食物中毒事件发生。

针对该起食物中毒事件进行分析，在之后的学校食品管理过程中需要加强卫生监管工作。食品卫生监督机构必须加大执法力度，加强学校等人群聚集场所的卫生监管工作。与此同时，还要加强食品卫生法等相关法律的宣传，提升食品安全管理水平，提高从业人员的卫生责任意识。特别是在夏秋季节，必须加强从业人员的健康检查工作。

参考文献：

[1]陈菲.关于一起由蜡样芽孢杆菌引起食物中毒的病原学检测[J].养生保健指南2020年51期，267页，2021.

[2]龙冬玲，张慧娟，萧松建，等.一起由蜡样芽孢杆菌引起的食物中毒实验室检测及分子溯源[J].河南预防医学杂志，2021（012）：032.

[3]郑金华，李公和，陆娟娟.2021年泰安市一起由蜡样芽孢杆菌引起食物中毒的调查[J].预防医学论坛，2022，28（4）：3.