摘要：目的：在本次实验通过建立6种医院抑菌剂在微生物环境下的限度检查方案的适用性。方法：进行抑菌剂微生物限度检查过程中，需要严格依据我国《中华人民共和国药典法》中的相关规定，在实验过程中采用培养基稀释法、综合法、薄膜过滤法等，几种方法进行医院抑菌制剂的微生物计数工作，并且在此背景下还需要开展医院抑菌制剂微生物的检查方法适用性试验工作。结果：在开展6种医院抑菌制剂微生物限度检查实验中，通过对金黄色葡萄球菌、枯草孢芽杆菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉、白色念珠菌等数种菌株的回收率进行测试，发现上述几种菌株的回收率在0.5～2.1之间，主要是通过金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌等检测出。结论：通过上述实验可以发现，在医院抑制菌剂微生物限度检查中采用薄膜过滤法、中和法和培养皿稀释法等方式，可以建立起多种抗菌药物和消毒防腐药物，并且这些药物的抑菌制剂微生物限度检查方法在实行过程中，方法较为便捷且结果准确可靠。

关键词：医院抑菌制剂;微生物;限度检查方法;培养基稀释法;薄膜过滤法;中和法

引言

医院抑菌制剂在临床应用过程中需要以患者的需求为导向，确保医院所生产的抑菌制剂具有一定的生产灵活性，从而弥补市场上药品在供给阶段，所出现的供给能力不足问题，这是当前我国医院临床抑菌制剂用药过程中的重要组成成分。根据当前我国国家卫生健康委员会所发布的《关于加强医疗机构药事管理促进合理用药意见》中，可以明确的了解到医院或其他医疗机构在开展药品配置管理工作中，需要重点针对医疗机构制剂调剂进行使用管理制度的建立，确保构建合理化的医疗联合体制机制，保证医疗抑菌制剂的产品稳定供给，并且建立可靠的质量控制体系。对医院抑制菌剂开展微生物限度检查，是进行医药产品质量控制的重要环节，同时也是保证医药产品检测结果可靠的基本要求。现阶段医院自制药剂通常有复方替硝唑溶液、复方呋喃西林滴鼻液、樟脑苯酚溶液、维生素E珍珠乳膏、复方碘溶液等，上述几种医院自制药剂均有不同的抑菌效果。但是医院自制抑菌剂中的抑菌成分会干扰患者微生物限度检查，因此进行自制剂含抑菌成分的微生物限度检查工作时，需要事先消除制剂中的抑菌活性，既要保障检测方法的适用性和可靠性。同时在开展检测过程中，需要针对不同抑菌成分的抑菌制剂，构建出针对性、重复性的微生物限度检查方案，如果培养基稀释法、薄膜过滤法和中和法等，将消除制剂抑菌活性，构建出准确可靠的微生物限度检查方案体系。

1 实验材料的选择

1.1实验仪器

在开展此项实验中需要选择 Bp2型号的架构天盘（上海医用激光仪器厂出品）、定制化的生化培养箱、台式桌面灭菌仪器、电热鼓风速成干燥箱、利丰生物安全柜等仪器设备。

1.2实验药品

在实验中所选择的药品主要有复方替硝唑溶液、复方呋喃西宁滴鼻液、樟脑苯酚溶液、维生素E珍珠乳膏、复方碘溶液等相关药品。

1.3实验菌株

在实验中所设置的菌株，主要是由金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、大肠埃希菌等菌群组合而成，并且由中国食品药品检测鉴定机构提供相关实验菌种。

1.4实验培养基及稀释液

在实验培养基及稀释液的制作过程中，实验人员需要选择大豆琼脂培养基、胰蛋白酶、葡萄糖琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基、迈尔凯琼脂培养基、溴化苯酚琼脂培养基等，对于特殊培养基型号需要由北京陆桥技术股份有限公司提供相关实验产品，并对培养基的生物安全性进行验证，确保培养基符合《中华人民共和国药典法》。

2 实验方法与结果

2.1实验供试液的制备过程

在实验供试液的制备过程中，吸烟人员需要选择复方替硝唑溶液与复方呋喃西林滴溶液相混合，对于混合后的溶液用滴管提取10毫升。将所提取的溶液用稀释液进行逐级稀释，分别稀释为10：1和100：1的供试液。在实验过程中还需选取樟脑苯酚溶液10毫升，将该溶液加入温热融化的聚氨酯中，用稀释液将该溶液进行稀释，分别稀释成10：1和100：1的供试液。在此次实验制作中，最大的难点便是对维生素E珍珠乳膏进行供试液制作，所制作的混合溶液需要提取维生素E珍珠乳膏10克，并将所提取的药膏加入温热融化的聚酸梨膏中，用稀释液对该混合溶液进行逐级稀释，分别稀释成10：1和100：1的供试液。此外还需要选取10毫升的复方碘溶液，将该碘溶液倒置量杯中，再往量杯中加入，浓度在0.5摩尔每升的硫酸钠溶液，选取该溶液10毫升，与杯中的碘溶液进行混合。在取得混合溶液后，需要将该溶液稀释成10：1的供试液。

2.2实验菌液的制备

在对此次实验菌液进行制备的过程中，实验人员需要严格依据《中华人民共和国药典法》中的相关条例，进行菌液制备。并用稀释液将所提取的菌液，分别稀释成适宜浓度的各菌悬液。

2.3实验需氧菌、酵母菌、霉菌总数计数方法

在对此次实验需氧菌、酵母菌与霉菌进行总数计数的过程中，实验人员需要分别从供试液中提取不同浓度的10毫升混合溶液，并将混合溶液标上 ABCD序号。将混合溶液以薄膜进行过滤，利用稀释液对过滤薄膜进行数次冲洗，溶液冲洗量需要控制在每次100毫升。在最后一次过滤薄膜冲洗的过程中，需要选择金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉的菌悬液进行混合，再次进行过滤。在此次过滤步骤完成后，需要将过滤膜提取，并将该过滤菌膜贴在琼脂培养基平板上方。然后分别提取不同浓度的供试液，将供试液中加入同等浓度的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、白色念珠菌等菌悬液各0.1毫升，实验人员需要将混合溶液摇匀。再通过选取容积在一毫升的无菌培养皿，往无菌培养皿中注入15～20毫升且温度在45摄氏度以下的融化琼脂，将该混合琼脂摇晃均匀，等待琼脂凝固。实验中供试品对照组可以选择稀释液代替菌液，对照组中菌液可以选择稀释液代替供试液，同时对于中合剂对照组，实验人员需要选择硫代硫酸钠溶液代替供试品，其余步骤均同于上述实验组。在计算回收率的过程中，需将实验组的平均菌落数减去公式品对照组平均菌落数，再将差值与菌液对照组平均菌落数相除，便可以得到此次实验的实验组回收率。经过此次实验验证，可以发现浓度在10%的聚山梨酯和浓度在0.5摩尔每毫升的硫代硫酸钠溶液相混合，不会对上述培养皿中的菌株生长造成影响。

讨论

本次研究中通过建立了6种医院制剂微生物抑菌作用限度检查方法。在本次试验检查方法中，通过对抑菌活性的供试品进行最低稀释级的适用性实验，便可以依据当前的微生物限度标准及菌数报告规则，在不影响判断结果的基准上，再次增加稀释激素进行实验，有效的消除了多种抑菌成分制剂在实验中的抑菌活性影响。实验中通过应用呋喃西林、氯霉素等抗菌药物，可以在针对不同剂型和不同抑菌成分的基础上，精准地消除抑菌成分对微生物限度检查所带来的干扰，因此试验结果较为准确、可靠。

参考文献

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