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摘要：目的：根据标准汤剂的制备方法制备18批栀子标准汤剂，并对其进行质量评价研究｡方法：收集产自不同地区的18批栀子饮片，并自行碾碎成栀子饮片，依据标准化工艺制备成18批栀子标准汤剂｡以出膏率､栀子苷含量及其转移率､特征图谱为主要表征参数，对栀子标准汤剂进行质量评价｡结果：栀子标准汤剂的出膏率在20.21%-24.39%之间;栀子苷转移率在46.19%-76.96%之间，其中特征图谱指认了京尼平1-β-D龙胆双糖苷、栀子苷、西红花苷等共6个共有峰｡结论：本研究通过对18批不同产地的栀子饮片进行制备，得到了符合相关技术要求的栀子标准汤剂。同时，建立的含量与特征图谱检测方法经过精密度、重复性和稳定性验证，表明该方法具有较好的可靠性和准确性。因此，该研究可以为栀子标准汤剂的制备及质量控制提供参考，也可以为其他中药材配方颗粒的制备及质量控制提供借鉴。总之，本研究为保障中药配方颗粒的质量和稳定性提供了新的思路和方法，对于中药材的质量控制和中药制剂的研发具有一定的参考价值。

关键词：栀子；标准汤剂；出膏率；含量测定；特征图谱

中图分类号：R28

Abstract： Objective To prepare 18 batches of gardenia standard decoction according to the preparation method of standard decoction， And 18 batches of gardenia decoction pieces were collected from different regions， And grind it into gardenia decoction pieces， 18 batches of gardenia standard decoction were prepared according to the standardized process， with the content of gardenia glycoside and the transfer rate as the main characterization parameters， Quality evaluation of gardenia standard decoction： the yield of gardenia standard decoction was between 20.21% and 24.39%; Gardenia glycoside transfer rate ranged between 46.19% and 76.96%， In this study， through the preparation of 18 batches of gardenia slices from different origin， Gardenia standard decoction that met the relevant technical requirements was obtained. At the same time， the established content and feature map detection method has been verified by precision， repeatability and stability， indicating that the method has good reliability and accuracy. Therefore， this study can provide a reference for the preparation and quality control of gardenia standard decoction， as well as for the preparation and quality control of other TCM formula granules. In conclusion， this study provides new ideas and methods for ensuring the quality and stability of TCM formula particles， and has certain reference value for the quality control of Chinese herbs and the development of Chinese medicine preparations.

Key words：Gardenia; standard decoction; paste out rate; content determination; characteristic map

中药栀子是本品为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实，泻火除烦，凉血解毒，清热利湿；外用消肿止痛。用于热病心烦，湿热黄疸，淋证涩痛，血热吐衄，目赤肿痛，火毒疮疡；外治扭挫伤痛[1]｡栀子的化学成分主要为环烯醚萜类[2]、单萜苷类[3]、二萜类[4]、三萜类[5]、黄酮类[6]等，其中栀子苷被认为是最主要的药效成分。现代药理学研究表明，栀子具有保肝利胆作用[7-9]､促进胰腺分泌作用[10]､降血糖、降血脂作用[11，12]､改善脑缺血损伤作用[13，14]､抗炎作用[15，16]等多种生物活性｡中药配方颗粒作为传统中药饮片的补充，是一种新型中药饮片，具有服用剂量小､使用方便､疗效可靠等特点[17-18]｡通过将标准汤剂作为参照，可以确保中药配方颗粒在生产工艺和质量标准方面与其相应的中药饮片临床汤剂基本一致。这有助于确保中药配方颗粒的稳定性和一致性，从而更好地承载中药饮片的安全性和有效性。

标准汤剂的制定需要考虑中药饮片的成分、性质和临床用法等因素。同时，还需要对制备标准汤剂的工艺流程、质量标准和技术参数等进行研究和规定，以确保标准汤剂的合理性和科学性。此外，通过建立特征图谱检测方法，可以更好地了解和控制中药配方颗粒的质量。特征图谱可以反映中药材及其提取物在产地、批次间的差异，有助于评估中药材及其提取物的质量一致性和稳定性。因此，将特征图谱检测方法与标准汤剂相结合，可以为中药配方颗粒的质量控制提供更加全面和有效的手段[19-23]｡

研究的主要目标是确定栀子标准汤剂的出膏率及有效成分转移率的范围，并建立其特征图谱检测方法。这些数据和方法的建立，可以为栀子标准汤剂及其配方颗粒的质量控制提供参考。出膏率和有效成分转移率是衡量中药材经提取、浓缩、干燥等工艺后所得干浸膏中有效成分含量的重要指标，对于评估中药材提取物的质量和效果具有重要意义。特征图谱检测方法则是一种用于表征中药材及其提取物化学成分组成的工具。它可以反映中药材及其提取物在产地、批次间的差异，有助于评估中药材及其提取物的质量一致性和稳定性。总的来说，这项研究旨在通过建立栀子标准汤剂的质量控制方法，以确保其质量和效果的一致性和稳定性，为中药材及其提取物的质量控制提供参考。

1 仪器与材料

1.1 仪器

LC-2030C 3D （ PDA with Cooler）高效液相色谱仪，配LC-2030C 3D Plus （Main unit） PDA with Cooler控制器､Pump unit双泵､PDA detector，二极管阵列检测器､Column oven 柱温箱､Auto sampler with sample cooler，自动进样器（带样品冷却）、LC-solution 色谱工作站（岛津中国） ；SHIMADZU SHimNex CS C18（5μm，25×0.46cm）； 十万分之一分析天平（赛多利斯科学仪器科技有限公司，QUINTX125D-1CN） ; 百分之一电子天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司，MP3002）；分体式陶瓷煎药壶（潮州市潮安区康雅顺电器有限公司，FTS-10A）；旋转蒸发仪（上海贤德有限公司，型号xiande-500A）；真空冷冻干燥机（宁波新芝冻干设备股份有限公司SCIENTZ-30YG/A）；

1.2 试药

栀子对照药材（批号：120986－201610），栀子苷对照品（批号：110749-201919，含量以97.1%计） ，均源于中国食品药品检定研究院；水为实验室自制超纯水 （18K） ; 乙腈（色谱纯，默克公司，SHBMP281） ；甲醇（色谱纯，默克公司，1123007049）；其余试剂均为分析纯｡

本研究从江西､湖南､及四川等产地收集了18批栀子药材并碾碎成为饮片。18批栀子饮片信息如表1所示，编号为CP（ZZ）01 ～ CP（ZZ）18｡经鉴定，均为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实｡

2 方法与结果

2.1 一般项目检查

按照2020年版《中国药典》 （四部） 中规定方法（分别为通则0832､通则2302､通则2201） ，对18批栀子饮片的水分､总灰分以及醇溶性浸出物进行测定，结果见表2｡18批栀子饮片的水分测定结果为6.0%～7.9%，总灰分测定结果为3.35%～5.13%，醇溶性浸出物测定结果为21.1%～24.3%。以上项目检查均符合 2020年版《中国药典》（一部） 对栀子饮片的规定｡

按照《中国药典》（2020版）（一部）中栀子饮片，【含量测定】项下方法进行测定，结果见下表3。18批栀子饮片中，栀子苷的最低值为4.0%，最高值为5.8%。18批栀子饮片中含量测定结果，说明这18批栀子饮片在栀子苷的含量方面是符合药典标准的，即栀子苷（C17H24O10）不得少于1.8% ｡

2.3 栀子标准汤剂的制备

称取18批栀子饮片，每批大约100克，将这些饮片投放到煎药壶中。煎煮两次。在第一次煎煮前，加入800毫升的水。将水升温至50℃～60℃后，浸泡30分钟。然后选择武火煎煮30分钟，趁热用两层200目尼龙筛网过滤出滤液。第二次煎煮前再加入600毫升的水，煮沸后选择文火煎煮20分钟，然后趁热用两层200目尼龙筛网过滤出滤液，合并两次煎煮液，65℃真空浓缩至300ml，即得栀子标准汤剂浓缩液，采用冷冻干燥机于进行冷冻干燥，得干膏粉末，备用。其编号与表3中各样品编号一致｡

2.4 栀子标准汤剂的含量测定与方法学考察

2.4.1 色谱条件与系统适用性试验

以C-18色谱柱（SHIMADZU SHimNex CS C18 5.0μm 4.6×250mm）；以比例为14%乙腈和86%水为流动相；PDA检测器波长设置为238nm。理论板数按栀子苷峰计算应不低于2500。

2.4.2 对照品溶液的制备

精密称取栀子苷对照品15.33mg，然后将其置于50ml容量瓶中。接着，加入甲醇至刻度，摇匀，使对照品充分溶解在甲醇中，然后，使用1ml的胖肚吸管精密吸取1ml的上述溶液，将其置于10ml的容量瓶中，接下来，再次加入甲醇进行稀释，直至容量瓶刻度线，摇匀，使溶液充分混合均匀后，配成浓度30.66μg/ml的对照品溶液备用。

2.4.3 供试品溶液的制备

取栀子饮片粉碎成细分，然后过四号筛，精密称定约0.1g，置150ml的具塞锥形瓶中，然后用50ml胖肚吸管吸取50%乙醇溶液加入到锥形瓶中，称定重量后，放置在超声波清洗机内超声处理20min，放冷，再称定重量，用50%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得｡液相进样前过0. 22 μm尼龙滤膜过滤。

2.4.4 线性关系考察

2.4.4.1制备栀子苷对照品储备溶液：精密称定11.69mg的栀子苷对照品，将其溶解在25ml的甲醇中，制成浓度为0.4676mg/ml的储备溶液。

2.4.4.2制备不同浓度的对照品溶液：从储备溶液中精密吸取1ml、1ml、1ml、3ml、3ml，分别置于50ml、20ml、10ml、10ml、5ml的量瓶中，用甲醇稀释定容，制成不同浓度的对照品溶液。这些溶液的浓度分别为每毫升9.352μg、23.38μg、46.76μg、140.28μg、280.56μg、467.6μg。

2.4.4.3液相色谱法测定栀子苷含量：使用液相色谱仪分别吸取上述对照品溶液和母液各10μl进行测定，得到各溶液的峰面积积分值。

2.4.4.4绘制标准曲线和计算回归方程：以进样量（μg）为横坐标，峰面积积分值（mAμ）为纵坐标，绘制标准曲线。通过计算得到回归方程Y = 21881x + 87991。相关系数r为0.9996，表明栀子苷含量在9.352μg/ml～467.6μg/ml范围内线性关系良好。

2.4.5 精密度实验

取了对照品溶液，按照样品测定方法，重复进样6次，以测定峰面积。对于每个独立的进样，都会记录其色谱峰面积。然后，对这些峰面积的结果进行比较和分析。这些结果之间的相对标准偏差（RSD）小于0.45%，证明仪器的精密度是良好的。

2.4.6 重复性实验

选取了（CP（ZZ）01）样品，并从中取了6份，每份约0.1克，精密称定。然后，按照供试品溶液的制备方法，制得了供试品溶液。接着，精密吸取了供试品溶液各10微升进行进样，并进行了测定。最后，根据测定的结果，计算了栀子苷含量的相对标准偏差（RSD）值。结果RSD值小于0.33%，说明该方法的重复性好，测量的结果可靠。

2.4.7 含量测定

依照“2.4.1”项下色谱条件，测定 18批栀子标准汤剂中栀子苷的含量，结果见表4｡

2.5 栀子标准汤剂的出膏率和栀子苷转移率的测定

2.5.1 出膏率将“2. 3”项下制备的18批栀子标准汤剂采用干燥称量法获得干膏质量，按公式（1）计算出膏率结果见表4。

18批栀子标准汤剂的出膏率为20.21% ～24.39% ｡

2.5.2 栀子苷转移率按公式（2） 计算栀子苷的转移率，结果见表4。

18批栀子标准汤剂中栀子苷转移率46.19% ～76.96%｡

转移率%= 标准汤剂中栀子苷含量×标准汤剂出膏率 ×100

药材中栀子苷含量

2.6 特征图谱的建立

2.6.1 色谱条件

色谱柱：C18 Superb 5μm 4.6×250mm，以乙腈为流动相A，以0.4%磷酸溶液为流动相B，按照下面梯度表进行洗脱，梯度洗脱条件见表5，后运行10min再进下一针；检测波长：0～23分钟为238nm，23～40分钟为440nm。理论板数按栀子苷峰计算应不低于3000。

2.6.2参照物溶液的制备

取栀子对照药材精密称定0.1g，置150ml具塞锥形瓶中，然后用50ml胖肚吸管吸取加 50%乙醇50ml，放置在超声波清洗机内超声处理20min，放冷，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液

2.6.2 供试品溶液的制备

同“2.4.3”项下供试品溶液制备。

2.6.3 精密度实验

选取（（CP（ZZ）01） 供试品溶液，依据“2.6.1”项下色谱条件连续进样6次，计算所有特征峰的保留时间、峰面积｡结果显示各特征峰的保留时间的RSD≤0.10% ，峰面积的RSD ≤1.20% ，表明该仪器精密度良好，见图1｡

2.6.4 重复性实验

选取（（CP（ZZ）01） 供试品溶液，依据“2.6.3”项下平行制备供试品溶液6次，依据 “2.6.1”项下色谱条件进样，计算所有共有峰的相对保留时间及相对峰面积。结果显示各共有峰的保留时间的RSD均小于0.11% ，峰面积的RSD均小于0.81% ，表明该方法重复性良好，见图2｡

7 特征图谱的建立

根据“2.6.1”项下色谱条件对18批供试品溶液样品进行测定，获得各样品在238nm和440nm波长下的色谱图信息。

18批栀子标准汤剂的HPLC-PAD（0～23分钟为238nm，23～40分钟为440nm）特征图谱､对照图谱及对照品图谱见图3、图4｡共获得6个共有峰，指认了特征峰3：京尼平1-β-D龙胆双糖苷；特征峰4：栀子苷；特征峰6是：西红花苷 I，并选择栀子苷为S峰，计算6个特征峰的相对保留时间，结果见表6、表7、表8｡

3讨论

本研究采集了18批不同产地栀子饮片，并将18批栀子饮片制成了标准汤剂｡为了对栀子标准汤剂的出膏率、指标成分转移率及特征图谱进行研究，使用Minitab 17软件对数据进行正态分布分析。

其出膏率P值为0.138，含量的P值为0.036，转移率P值为0.217，其中出膏率、转移率的P值＞0.05，证明其出膏率、转移率结果符合正态分布，具有数据统计学意义，而含量P值＜0.05，不符合正态分布，证明存在异常数值，再进一步对15批栀子标准汤剂的出膏率、转移率进行单方差计算，其出膏率Variance值为0.00190、转移率Variance值为0.00134，均＜0.05，证明其数据不存在显著性差异｡而含量通过异常数据剔除分析，发现其样9、样10、样11整体数据比群数据高，孤立在范围外，为异常数据，分析其原因可能与制备过程及饮片含量有关，为了更好的判断标准汤剂制备工艺的可靠性及准确性，通过出膏率及转移率的方差分析数据作为评判依据，为栀子标准汤剂及其配方颗粒的质量控制提供了参考｡

栀子标准汤剂中的指标成分主要是指环烯醚萜类成分，其中包括栀子苷、1-羟基-7-1，4a，5，7a-四氢化戊二烯骈吡喃-4-醛、栀子新苷甲酯和山栀子苷等。栀子苷是栀子中活性最高的物质之一，也是中药栀子中最有效的成分之一。

因此，栀子标准汤剂的指标成分应该包括栀子苷等环烯醚萜类成分。

该物质对酸较为敏感，易被酸水解。因而选择栀子苷作为指标成分以计算标准汤剂中指标成分的转移率｡

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作者简介：刘占伟（1984—），男，汉族，吉林通化人，长春中医药大学本科，修正药业集团亳州制药有限公司总经办助理工程师，研究方向为配方颗粒制备工艺及质量研究。