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摘要：通过采用《食品安全国家饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖的测定方法》中第一法高效液相色谱法，本文旨在检测蜂蜜中果糖、葡萄糖和蔗糖的数量，以确保其符合标准规定。结果表明，实验结果显示，果糖和葡萄糖含量的增加会导致结晶情况的变化。通过对不同地区同品种蜂蜜进行测定，果糖、葡萄糖、蔗糖含量略有差异。本研究重点关注高效液相色谱法，以及果糖和蔗糖的分析方法。

引言

蜂蜜是一类纯天然甜产物，由蜜蜂从自然开花植株中收集的花蜜进行精心酿造而成，具有清香浓烈的味道，口感纯正甜美。蜂蜜的主体是糖类，当中60%～80%是人类极易消化吸收的葡萄糖和果糖，是一个营养丰富的滋补品，能够满足人们的养分需求。蜂蜜是一种糖的过饱和溶液，在温度条件下，一些单花蜜会形成晶体，其中葡萄糖是主要，而果糖则是其次成分。

1、材料与方法

1.1仪器与试剂

本次实验的实验仪器是使用的安捷伦公司生产的1260液相色谱仪来作为主要的检测设备，同时还有MilliQOlntergrall3超纯水机、赛多利斯SQPQUINTIX224-1CN万分之一分析天平以及腾津的0.45μm微孔滤膜。试剂主要选用了由中国计量科学研究院的果糖纯度标准物质（GBW10063，99.7%）、葡萄糖纯度标准物质（GNW10062，99.7%）、蔗糖纯度标准物质（GBW10067，99.7%）以及乙腈[1]。

1.2实验方法

根据《保健食品标准饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定方法》（GB5009.8—2016）中第一法高效液相色谱法，对样品进行精确的制备和分析，并确定了色谱参考条件，最终得出了准确的结果[2]。从葡萄糖、果糖、蔗糖中取出500mg，精确称量后，将它们依次放入25mL容量的瓶中，加入70%乙腈–水，稀释至标线，摇匀，即可配制出含量均为20mg/mL的三种糖类混合标准储存液。从果糖、无水葡萄糖、蔗糖中精确取出0.25mL、0.5mL、1mL、3mL和5mL混入标准储备液，将其装入10mL容量瓶中，加入50%的溶剂，以此来制取系列混合标准工作溶液。将试样剪碎，取1g，精确称量，放入25mL容积瓶中，加入25mL70%乙腈–水，超声波加工30min，放冷后用70%乙腈–水补足减失的体积，混匀，将混合物稀释至标线，摇匀，配置成三种糖类质量浓度依次为0.5、1、2、6、10mg/mL的系列混合标准工作溶剂，以供实验使用。通过使用0.45μm微孔滤膜筛选，取出续滤液用作试样溶剂[3]。

2、结果与分析

2.1制定标准曲线

在同样的实验条件下，对浓度为0.5mg/mL、1mg/mL、2mg/mL、6mg/mL、10mg/mL的标准液进行测定。从而得到标准曲线，标准线性方程为：

果糖：线性方程Y=177990.30848X+3430.93155；相关系数0.99975

葡萄糖：线性方程Y=148849.58973X-8226.15179；相关系数0.99963

蔗糖：线性方程Y=193203.67321X-6378.07440；相关系数0.99953

2.2重复性实验

在标准浓度曲线下选择6mg/mL的浓度进行重复性实验，重复性实验结果如下。

果糖：平均值6.071（mg/mL）；标准差0.015；RSD/%＝0.26。

葡萄糖：平均值6.048（mg/mL）；标准差0.133；RSD/%＝2.21。

蔗糖：平均值6.027（mg/mL）；标准差0.106；RSD/%＝1.76。

2.3回收率实验

称取1g样品放入50mL的容量瓶中作为本底，并进行三次测量，然后再分别称取3分同样的样品放入50mL的容量瓶中，然后加入2.0mg/mL、4.0mg/mL、6.0mg/mL的标量液，并对每个浓度分别进行3次测定。从而来计算回收率。回收率结果如表3所示。

2.4样品测定

本文对16中蜂蜜中的果糖、葡萄糖以及蔗糖的含量进行了测量，测量结果如表4所示。通过测量可以发现16种蜂蜜的果糖。葡萄糖以及蔗糖的含量均符合要求。

从表4可以看出，16份蜂蜜样品中的果糖、葡萄糖和蔗糖的结果符合GB14963-2011中蔗糖（g/100G）≤5、果糖和葡萄糖（g/100g）≥60的标准要求[6]。自采蜜、枣花蜜、党参蜜等非结晶样品的葡萄糖含量相对较低，而椴树蜜、枸杞蜜、紫云英蜜等非晶体样品的葡萄糖浓度相对较高。

3、结语

综上所述，本文通过液相色谱法对不同蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖的质量进行了测定。通过测量结果可以看出所有蜂蜜中的果糖、葡萄糖和蔗糖的含量均符合相关标准。同时不同种类的蜂蜜中果糖、蔗糖和葡萄糖的含量均存在一定的区别。

参考文献

[1]逯平杰，代容春，叶冰莹，等.高效液相色谱法测定甘蔗节问果糖、葡萄糖和蔗糖的含量[J].食品科学，2011，32（2）：198-200.

[2]倪铭炯，丁泽华.蜂蜜中果糖、葡萄糖和蔗糖的质量研究[J].食品安全导刊，2022（20）：107-109.

[3]陈晶，王京辉，傅欣彤，等.HPLC-CAD法测定玉竹中果糖、葡萄糖和蔗糖的含量[J].中国药品标准，2022，23（6）：629-632.DOI：10.19778/j.chp.2022.06.012.